Phương pháp chuẩn bị môi trường bột khô thành chất lỏng gần giống nhau và các bước chung như sau:
Chuẩn bị nguyên liệu:
Đảm bảo bạn có đủ nước tinh khiết cấp nuôi cấy tế bào hoặc cấp tiêm, cũng như các chất phụ gia cần thiết như dung dịch natri bicarbonate 7,5%, dung dịch L-glutamine 200mM, dung dịch axit clohydric 1N và dung dịch natri hydroxit 1N.
Bột khô hòa tan:
Đổ môi trường bột khô vào thùng chứa.
Sử dụng một lượng nước thích hợp (thường là nước tinh khiết cấp nuôi cấy tế bào hoặc nước tinh khiết cấp tiêm) để hòa tan hoàn toàn bột khô.
Đảm bảo tổng lượng nước bằng 2/3 tổng lượng môi trường lỏng cần thiết.
Điều chỉnh giá trị pH:
Sử dụng máy đo pH hoặc que thử độ pH chính xác để điều chỉnh độ pH của môi trường đến mức mong muốn, thường là 7,2-7,4.
Thêm chất phụ gia:
Theo hướng dẫn sản phẩm và yêu cầu thử nghiệm, thêm lượng natri bicarbonate, L-glutamine và các chất phụ gia khác thích hợp.
Lọc để loại bỏ vi khuẩn:
Màng lọc vi mô 0,22um được sử dụng để lọc và loại bỏ vi khuẩn nhằm đảm bảo tính vô trùng của môi trường.
Cứu:
Môi trường lỏng đã chuẩn bị được bảo quản tránh ánh sáng ở nhiệt độ 2oC ~ 8oC.
.
Xin lưu ý:
1. Tỷ lệ cụ thể và các bước chuẩn bị có thể khác nhau tùy theo nhãn hiệu và loại môi trường bột khô khác nhau, vì vậy cần đọc kỹ hướng dẫn trên túi đóng gói của môi trường trước khi sử dụng.
2. Phải tiến hành thử nghiệm vô trùng sau khi chuẩn bị môi trường nuôi cấy để phát hiện xem môi trường nuôi cấy có bị nhiễm bẩn hay không.
3. Lượng chất lỏng chuẩn bị trong mỗi mẻ nên được sử dụng trong khoảng 2 tuần, để tránh mất chất dinh dưỡng do để lâu.